TG1感受态细胞
产品编号 | 产品名称 | 规格 |
MCC0810 | TG1感受态细胞 | 100μl*10 |
保存条件:-80℃。
1.产品简介:
本产品是采用大肠杆菌TG1菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,生长速度最快的克隆用大肠杆菌菌株之一,主要用于噬菌体展示,也可用于构建克隆,蓝白斑筛选等实验。
基因型:supEthi-1Δ(lac-proAB)Δ(mcrB-hsdSM)5(rK–mK–)[F´traD36proABlacIqZΔM15]
特点:1.TG1来源于E. coli K-12菌株,是目前生长速度最快的克隆用大肠杆菌菌株之一,在平板上37℃,7 h可见克隆。2.菌株不含核酸酶endA1突变,体内核酸酶含量较高,提取质粒时推荐使用质粒提取试剂盒中去蛋白液以去除菌体内大量的核酸酶。3.lacIqlacZΔM15 的存在使 TG1 可以进行蓝白斑筛选。pUC19质粒检测,转化效率可达108 cfu/μlDNA。
2.使用说明:
1.取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。
2.待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30min。
3.42℃热击45sec,然后快速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3min,该过程不要摇动离心管。
4.每个离心管中加入450 μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床, 150 rpm振荡培养45~60min使菌体复苏。
5.根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12~16h。
3.注意事项:
1.刚化冻的细胞转化效率最高,避免反复化冻。
2.整个动作要轻柔。
*本试剂仅供实验室研究使用