ArcticExpress(DE3)RP感受态细胞

保存条件：-80℃。

1.产品简介：

本产品是采用大肠杆菌ArcticExpress(DE3)RP感受态细胞菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞。ArcticExpress细胞可以解决细菌基因表达中常见的蛋白质不溶解障碍。

基因型：E.coliBF–ompThsdS(rB–mB–) dcm+ Tetr gal λ(DE3) endAHte [cpn10 cpn60 Gentr] [argUproLStrr]

特点：1．ArcticExpress(DE3)RP衍生自高性能BL21-Gold感受态细胞，在被改造后拥有了许多额外的基因片段，这些片段可以表达出那些稀有的tRNA，使异源蛋白质在大肠杆菌中高效高水平地表达。2．可以表达对低温适应的伴侣蛋白Cpn10和Cpn60（来自于嗜冷菌，Oleispiraantarctica）。3．提高富含GC-的真核基因在原核系统中的表达水平。无论是使用DE3溶素原菌株的T7启动子，或可诱导的IPTG，还是使用非DE3溶素原菌株的非T7启动子，ArcticExpress菌株都可用于重组蛋白的表达。具链霉素抗性。pUC19质粒检测，转化效率可达10⁸cfu/μg DNA。

2.使用说明：

1．取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。

2．待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA（根据实际情况加入适量的DNA，通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和），用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30min。

3．42℃热击45sec，然后快速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3min，该过程不要摇动离心管。

4．每个离心管中加入450 μl无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃摇床， 150 rpm振荡培养45～60min使菌体复苏。

5．根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养， 37℃培养12~16h。

3.注意事项：

1．刚化冻的细胞转化效率最高，避免反复化冻。

2．整个动作要轻柔，质粒质量和浓度等的差异会使转化效率有所下降。

*本试剂仅供实验室研究使用