XL2-Blue感受态细胞

保存条件：-80℃。

1.产品简介：

本产品是采用大肠杆菌XL2-Blue菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，适用于大质粒DNA和重组产物的转化，降低片段大小的偏爱性，多用于文库构建。

基因型：TetRΔ(mcrA)183 Hte[F′{proAB lacIq lacZM15Tn10(TetR)AmyCamR}](mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44thi-1 recA1 gyrA96 relA1

特点：1．XL2-Blue菌株来源于XL1-Blue菌株，为HTE基因型。Hte使得XL2-Blue适用于大质粒DNA和重组产物的转化，降低片段大小的偏爱性，多用于文库构建，已成功应用于40kd质粒的构建。2．recA1和endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。3．hsdSMR突变导致EcoK核酸内切酶系统缺失，增强了外源DNA的稳定性和提取质量。4．lacZΔM15 的存在使XL2-Blue菌株可用于蓝、白斑筛选。此菌株具有四环素和氯霉素抗性。pUC19质粒检测，转化效率可达10⁸ cfu/μg DNA。

2.使用说明：

1．取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。

2．待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA（根据实际情况加入适量的DNA，通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和），用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30min。
3．42℃热击45sec，然后快速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3min，该过程不要摇动离心管。
4．每个离心管中加入450 μl无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃摇床，150 rpm振荡培养45～60min使菌体复苏。
5．根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12~16h。

3.注意事项：

1．刚化冻的细胞转化效率最高，避免反复化冻。

2．整个动作要轻柔。

*本试剂仅供实验室研究使用