Stbl2感受态细胞

保存条件：-80℃。

1.产品简介：

本产品是采用大肠杆菌Stbl2菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，适合克隆不稳定插入片段、适于克隆甲基化的基因组序列，也可用于慢病毒载体载体的构建。

基因型：F- mcrAΔ(mcrBC-hsdRMS-mrr)recA1 endA1lon gyrA96 thi supE44 relA1λ-Δ(lac-proAB)

特点：1. Stbl2菌株来源于 JM109 E. coli strain。2. mcr A 突变和 mcr BC-hsdRMS-mrr deletion 使该菌株更适于克隆甲基化的基因组序列；同时 Stbl2 也可用于慢病毒载体的构建。3. recA1 和 endA1 的突变有利于克隆 DNA 的稳定和高纯度质粒 DNA 的提取。不可用于蓝、白斑筛选。pUC19质粒检测，转化效率可达108 cfu/μlDNA。

2.使用说明：

1．取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。

2．待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA（根据实际情况加入适量的DNA，通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和），用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30min。

3．42℃热击45sec，然后快速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3min，该过程不要摇动离心管。

4．每个离心管中加入450 μl无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃摇床， 150 rpm振荡培养45～60min使菌体复苏。

5．根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12~16h。

3.注意事项：

1．感受态细胞最好在冰上融化。

2．混入质粒或连接产物时应轻柔操作。

3．转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。

*本试剂仅供实验室研究使用