产品介绍:
本试剂盒先将抗体固定在磁珠固相载体上,再进行洗脱中和。本试剂盒操作不需要离心等步骤,操作更简便,纯化快,即使抗体含有BSA、叠氮钠、甘油等都不影响纯化效率。
本试剂盒亮点:
可以直接纯化抗血清,腹水,细胞培养上清中的抗体。
基本原理:
本试剂盒先将抗体固定在预处理超顺磁性聚合物微球表面,使抗体与其他蛋白分离,再将通过洗脱、中和即可得到高纯度的抗体。可从血清、腹水等样品中分离出纯度大于90%的抗体。
主要特点:
ü 试剂盒组分齐全,操作简单,只要按照操作步骤进行便可得到高品质抗体;
ü 本试剂盒所配置的磁珠与抗体结合能力高,蛋白非特异吸附率低;
ü 本试剂盒操作时间短,不需要离心机等仪器。
试剂盒已经提供材料:
规格 | 1mg | 2mg | 5mg |
抗体固定磁珠 | 100ul | 200ul | 500ul |
抗体洗脱液 | 15ml | 30ml | 30ml |
抗体稳定液 | 15ml | 30ml | 30ml |
抗体保存液 | 2ml | 2ml*2 | 10ml |
磁力架 | 1支 | 1支 | 1支 |
磁珠保存液 | 2ml | 4ml | 10ml |
说明书 | 1份 | 1份 | 1份 |
其他需要自备试剂材料:
² 待标记的抗体;
² 移液器及吸头;
² PBS(pH 7.2)
² 去离子水。
² 旋转离心管摇床(非必须)
试剂盒储存
试剂盒磁力架室温存放,其余组分放在2-8℃可保存6个月以上。
试剂盒操作流程(按1mg抗体标记量):
实验前,将试剂盒各组分平衡到室温;
1.抗体的固定分离
1)取出抗体固定磁珠,吸头(用剪刀剪去吸头尖部,使吸口变大)吹打成悬浊液,立即取出适量磁珠悬浊液(此时磁珠为50%悬浊液,按照100ul悬浊液对应1mg抗体),加到1.5ml离心管中,将离心管放入磁力架上,待磁珠被全部吸附到离心管侧壁,将移液器吸头插入到离心管底部吸干磁珠保护液;
2)将离心管移出磁力架,加入1ml PBS缓冲液,吹打成悬浊液,重新放入磁力架静置,待磁珠被全部吸附到离心管侧壁,将移液器吸头插入到离心管底部吸干PBS;
3)重复1.抗体的固定分离-2) 三次;
4)将磁珠离心管移出磁力架,待标记抗体(抗血清,腹水或者细胞上清)用PBS调整为约2mg/ml浓度,加入磁珠离心管中,盖紧管盖,放在离心管旋转摇床上摇晃30分钟;
5)将离心管重新放回磁力架,待磁珠被全部吸附到离心管侧壁,将移液器吸头插入到离心管底部吸干液体;
6)重复1.抗体的固定分离-2) 三次;
7)将离心管移出磁力架,按照1mg抗体对应400ul抗体洗脱液,吹打磁珠10次,将离心管重新放回磁力架,待磁珠全部被吸附到离心管侧壁,将移液器吸头插入到离心管底部吸取全部的洗脱标记抗体,转移到新的离心管,立即加入100ul抗体稳定液,即得到纯化的抗体。
8)纯化后的磁珠重复步骤1.抗体的固定分离-2) 三次,加入适量的磁珠保存液后2-8℃保存,磁珠可重复使用5-10次。
2.抗体的保存(选做)
加入等体积抗体保存液,-20℃保存。
注意事项:
1)本试剂盒只针对抗体(非IgM亚型)的纯化
2)本试剂盒中组分抗体洗脱液若有沉淀析出,为正常现象,离心取上清即可。
3)试剂盒组份在运输过程中可能造成颠倒,会使液体或干粉试剂粘到管壁或瓶盖上。使用前请离心处理,以使附着管壁或瓶盖的液体或干粉试剂沉积到管底。
4)由于抗体洗脱后,需尽快加入抗体稳定液;
5)本试剂盒中的磁力架中磁铁为特殊材质,避免长时间放在磁铁和铁磁性材质附近,避免磁力消失。
仅供科研实验使用