FITC-酪胺信号放大试剂盒
1.包装清单:
产品编号 | 产品名称 | 规格 |
ARL0024K | FITC-酪胺 | 1mg(溶解于 DMF,稳定剂) |
酪胺稀释液(过氧化氢溶液) | 50ml |
2.保存条件:冷藏运输,FITC-酪胺-20°C 保存,过氧化氢溶液 2~8°C 保存,试剂盒稳定至少一年。
3.产品简介:
异硫氰酸荧光素(FITC)是免疫分析中最常用的荧光物质,FITC-酪胺信号放大系统可显著增强基于辣根过氧化物酶标记的 ELISA 和免疫组化的检测灵敏度。FITC-酪胺在辣根过氧化物酶催化下氧化, 产物迅速共价结合在固定相蛋白质上,再检测 FITC(荧光检测或用标记的抗 FITC 抗体检测)。通过此技术,可显著提高检测的灵敏度和降低试剂的使用量。
4.实验步骤:
A.使用前试剂准备:
FITC-酪胺工作液:ELISA 最佳工作浓度 20μg/ml,IHC 最佳工作浓度100μg/ml,现配先用,如:10ml 过氧化氢溶液中加入 200μlFITC-酪胺。
过氧化氢溶液可自行配制 : 0.01M PB,0.15mol/L NaCl ,pH7.4, 或0.01MTris-HCl,0.15mol/L NaCl,pH7.4,加入 0.01% H2O2。
B.使用方法(仅供参考):
ELISA: 1.HRP标记物孵育;2.用洗涤液洗四遍;3.加FITC-酪胺工作液,每孔100μl, 室温孵育10分钟;4.用洗涤液洗四遍;5.加HRP标记的抗FITC抗体室温孵育30分钟;6.用洗涤液洗四遍;7.加TMB底物显色15分钟;8.用0.3M硫酸或0.5M盐酸终止反应,5分钟内测定OD450。
免疫组化1:1.HRP标记物孵育;2.用洗涤液洗四遍;3.FITC-酪胺工作液,每张片子100-300μl, 室温孵育10分钟;4.用洗涤液洗四遍,观察结果。
免疫组化2:1.与FITC标记的抗体孵育30分钟;2.用洗涤液洗四遍;3.加HRP标记的抗FITC抗体室温孵育30分钟;4.用洗涤液洗四遍;5.FITC-酪胺工作液,每张片子100-300μl, 室温孵育10分钟;观察结果。
5.注意事项:
1) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
*本试剂仅供实验室研究使用