SMD1168酵母感受态细胞
产品编号 | 产品名称 | 规格 |
MCC0222 | SMD1168酵母感受态细胞 | 100μl*10 |
酵母促转化剂 | 100 μl /-20℃ | |
毕赤酵母转化液 | 5 ml /4℃ |
保存条件:-80℃。
1.使用说明:
1). 取需转化质粒5µg,酶切,回收
2).取一支无菌的1.5ml EP管,依次加入预冷的线性质粒1-5 µg (体积不高于15 µl),酵母促转化剂 10µl,100µl冰上融化的 SMD1168感受态细胞,毕赤酵母转化液 500µl,轻轻翻转混匀6-8次
3).30℃ 水浴30min,每10min轻轻翻转混匀6-8次;
4).每支加入20ul的二甲基亚砜
5).42℃水浴15min,每5min轻轻翻转混匀6- 8次;
6).12000rpm瞬时离心弃上清,每支加入1m1的YPD Plus于30℃复苏1h
7).12000rpm瞬时离心弃上清,用100ul 0.9% NaCl 重悬,涂板,30℃培养48 - 96h。
2.注意事项:
1).使用酵母促转化剂前,请把装有酵母促转化剂的管子在沸水 中煮沸5min,然后立即放在冰上,用后放在-20℃储存备用
2).转化液低温环境下会析出,请于常温下完全溶解后使用
3).转化全过程要无菌操作
*本试剂仅供实验室研究使用