Frdbio®PEG1450融合剂
货号 | 产品名称 | 规格 |
MAC0011 | Frdbio®PEG1450融合剂 | 5*1ml |
保存:2-8℃,有效期1年
一.产品简介
聚乙二醇(Polyethylene Glycol,PEG)是细胞融合化学法中最常用 的融合剂,是杂交瘤单克隆抗体制备等免疫学实验中首选的细胞融合剂。本品是含50%(w/v)聚乙二醇(平均分子量1450)的D-PBS 溶液(不含钙、镁)即用型无菌溶液。如果需要浓度较低的溶液, 可使用不含钙的无菌D-PBS稀释。本品温和对细胞伤害小,具有操作简便,易于控制,融合率高等特点,适合制备杂交瘤细胞。
二.操作步骤
以小鼠杂交瘤融合实验为例。
1.取 1 支组分 (1 mL)放置于 37℃水浴锅内预热。
2.无菌环境下,在 50 mL 离心管中,将需要融合的 SP2/0 细胞与 小鼠脾细胞,按照合适的细胞数量比例混合在一起,并悬浮于适 量的 RPMI-1640 培养基中。然后离心,800 rpm/min,离心 3-5 min, 弃掉 RPMI-1640 培养基上清,留离心管底部的混合细胞团进行后 续操作。
3.无菌环境下,往混合细胞团上缓慢滴加 1 mL 组分,动作应轻柔, 在 60-90 S 滴加完毕为宜。
4.往离心管内,缓慢滴加无菌 1640 培养基,滴加 1640 培养基的 具体方法有多种,下列方法仅供参考。
1)在 1 min 内逐滴加入 1 mL 无菌 RPMI-1640 培养基;
2)然后 1 min 内逐滴加入 3 mL 无菌 RPMI-1640 培养基;
3)最后 3 min 内逐滴加入 16 mL 无菌 RPMI-1640 培养基。 5. 离心,800 rpm/min,离心 3-5 min,去上清,离心管底部即为杂 交瘤细胞,可以进行后续筛选和亚克隆实验。
*本试剂仅供实验室研究使用