DB3.1感受态细胞

1．包装清单：

2．保存条件：-80℃。

3．产品简介：

本产品是采用大肠杆菌DB3.1菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，适用于构建或扩繁含有ccdB基因的质粒载体。

基因型：F- gyrA462 endA1 glnV44 (sr1-recA)mcrBmrrhsdS20(rB-,mB-)ara14galK2lacY1proA2rpsL20(Smr)xyl5 Δleu mtl1

特点：1. DB3.1菌株含有 gyrA462 基因，有对ccdB 毒性基因的抗性，特别适用于构建或扩繁含有 ccdB 基因的质粒载体。具链霉素抗性。pUC19检测，转化效率可达10⁸ cfu/μl DNA。

4．使用说明：

1． 取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。

2．待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA（根据实际情况加入适量的DNA，通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和），用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30min。
3． 42℃热击45sec，然后快速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3min，该过程不要摇动离心管。
4．每个离心管中加入450 μl无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃摇床， 150 rpm振荡培养45～60min使菌体复苏。
5． 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养， 37℃培养12~16h。

5．注意事项：

1. 刚化冻的细胞转化效率最高，避免反复化冻。

2. 整个动作要轻柔。

*本试剂仅供实验室研究使用