关键词:抗体制备抗体标记重组蛋白表达

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Frdbio® Strep-tag II标签蛋白纯化试剂盒


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产品品牌:Frdbio 产品货号:PPR0022k
保存温度:2-8℃ 有效日期:24个月
英文名称:Frdbio® Strep-tag II -tagged Protein Purification kit
规      格: 1ml*2 5ml
价      格:优惠价 ¥1880
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产品介绍:

Frdbio® Strep-tag II标签蛋白纯化试剂盒用于纯化各种表达系统中含有Strep-tagII或者TwinStrep-tagII标签的重组蛋白,包括大肠杆菌表达系统、哺乳动物表达系统、酵母表达系统等等;本试剂盒配备了纯化蛋白所必需预装柱及核心试剂。

本试剂盒中预装柱的填料为Streptactin Beads 4FF。偶联到填料的蛋白配基为改良Streptactin蛋白,主要优势如下:

 

本蛋白纯化试剂特点:

Ø  Strep-tagII/TwinStrep-tagII这两个标签标小,并且对蛋白结构没有影响;

Ø  Strep-tagII/TwinStrep-tagII标签与Streptactin亲和力高,非6*His、GST之辈可比;

Ø  Streptactin Beads这个纯化可以耐受变性剂,在高浓度尿素和盐酸胍里仍然可以轻松挂柱,纯化包涵体不是障碍;

Ø  生物素可以轻松洗脱,不需要昂贵的脱硫生物素;

Ø  洗脱条件温和,不会对蛋白造成造成损伤;

Ø  填料再生简单,反复使用,实验室测试表明再生15次后,Streptactin Beads填料效率没有明显降低。

 

产品主要参数:

基质:交联度4%琼脂糖凝胶

配体:改良Streptactin蛋白

载量:4mg Twin Strep-tagII蛋白/ml基质

介质微球粒径:45-165um

最大流速:300cm/h

                                         


试剂盒已经提供材料:

产品编号

预装柱

浓缩基础缓冲液(10X)

浓缩洗脱缓冲液(10X)

浓缩再生缓冲液(10X)

PPR0022k-2*1mL

1mL*2

30ml

15ml

15ml

PPR0022k-5mL

5mL

30ml*2

30ml

30ml

其他需要自备试剂材料:

²  待纯化蛋白样品;

²  移液器及吸头;

²  去离子水;

²  0.22μm或0.45μm滤膜过滤。

 

产品储存

储存缓冲液:含20%乙醇的1×PBS

储存温度:2-8℃


产品使用操作:

1.使用前准备

1)缓冲液的准备

基础缓冲液:

按照实验所用量,取试剂盒中浓缩基础缓冲液,加入9倍体积的去离子水稀释成基础缓冲液;

洗脱液:

按照实验所需用量,取试剂盒中浓缩洗脱液,加入9倍体积的去离子水稀释成洗脱液;

再生液:

按照实验所需用量,取试剂盒中浓缩再生液,加入9倍体积的去离子水稀释成再生液;

 

缓冲液在使用之前建议用0.22μm或0.45μm滤膜过滤。

 

2)样品准备样品

使用上述基础缓冲液制备上样样品(细胞/细菌裂解液),样品在上样前用0.22μm或0.45μm滤膜过滤,防止堵塞柱子。

 

3)Frdbio® Streptactin Beads 4FF纯化柱的准备

取出试剂盒中预装柱平衡到室温,打开纯化柱底部开关,用3-5个体积去离子水冲洗柱床,随后用5-10个柱床体积基础缓冲液平衡柱子,确保柱床无气泡。

 

2.从样品中纯化目标蛋白

1)使用蠕动泵上样或者直接上样(重力法);

上样量不要超过柱子的结合能力。

2)上样完毕后,用基础缓冲液洗掉未结合的杂蛋白,直到到紫外吸收监测仪达到一个稳定的基线(一般需要10-15个柱体积);

3)使用洗脱液洗脱目的蛋白,顺次接收并做好标记,直到到紫外吸收监测仪达到一个稳定的基线(一般需要5-10个柱体积);

4)SDS-PAGE检测分析得到的纯化样品(包括流穿组分、洗杂组分和洗脱组分)以及原始样品。

 

3.纯化柱清洗、再生与保存。

1)5-10倍柱床体积的洗脱缓冲液继续清洗;

2)3倍柱床体积的去离子水清洗;

3)5-10倍柱床体积的0.1M NaOH溶液;

4)3倍柱床体积去离子水清洗后于含20%乙醇的PBS 2-8℃保存。


下载:Frdbio® Strep-tag II标签蛋白纯化试剂盒

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