027-87877773
产品介绍：
Frdbio® Strep-tag II标签蛋白纯化试剂盒用于纯化各种表达系统中含有Strep-tagII或者TwinStrep-tagII标签的重组蛋白，包括大肠杆菌表达系统、哺乳动物表达系统、酵母表达系统等等;本试剂盒配备了纯化蛋白所必需预装柱及核心试剂。
本试剂盒中预装柱的填料为Streptactin Beads 4FF。偶联到填料的蛋白配基为改良Streptactin蛋白，主要优势如下：
本蛋白纯化试剂特点：
Ø Strep-tagII/TwinStrep-tagII这两个标签标小，并且对蛋白结构没有影响；
Ø Strep-tagII/TwinStrep-tagII标签与Streptactin亲和力高，非6*His、GST之辈可比；
Ø Streptactin Beads纯化可以耐受变性剂，在高浓度尿素和盐酸胍里仍然可以轻松挂柱，纯化包涵体不是障碍；
Ø 生物素可以轻松洗脱，不需要昂贵的脱硫生物素；
Ø 洗脱条件温和，不会对蛋白造成造成损伤；
Ø 填料再生简单，反复使用，实验室测试表明再生15次后，Streptactin Beads填料效率没有明显降低。
产品主要参数：
基质：交联度4%琼脂糖凝胶
配体：改良Streptactin蛋白
载量：4mg Twin Strep-tagII蛋白/ml基质
介质微球粒径：45-165um
最大流速：300cm/h
试剂盒已经提供材料：
产品编号 | 预装柱 | 浓缩基础缓冲液（10X） | 浓缩洗脱缓冲液(10X) |
PPR0022k-2mL | 1mL*2 | 30ml | 15ml |
PPR0022k-5mL | 5mL | 30ml*2 | 30ml |
其他需要自备试剂材料：
² 再生液:1M NaOH；
² 储存缓冲液:20%乙醇的1X PBS
² 待纯化蛋白样品；
² 移液器及吸头；
² 去离子水；
² 0.22μm或0.45μm滤膜过滤。
产品储存
储存缓冲液：含20%乙醇的1×PBS
储存温度：2-8℃
产品使用操作：
1.使用前准备
1）缓冲液的准备
基础缓冲液:
按照实验所用量，取试剂盒中浓缩基础缓冲液，加入9倍体积的去离子水稀释成基础缓冲液；
洗脱液:
按照实验所需用量，取试剂盒中浓缩洗脱液，加入9倍体积的去离子水稀释成洗脱液；
缓冲液在使用之前建议用0.22μm或0.45μm滤膜过滤。
2）样品准备样品
使用上述基础缓冲液制备上样样品（细胞/细菌裂解液），样品在上样前用0.22μm或0.45μm滤膜过滤，防止堵塞柱子。
3）Frdbio® Streptactin Beads 4FF纯化柱的准备
取出试剂盒中预装柱平衡到室温，打开纯化柱底部开关，用3-5个体积去离子水冲洗柱床，随后用5-10个柱床体积基础缓冲液平衡柱子，确保柱床无气泡。
2.从样品中纯化目标蛋白
1）使用蠕动泵上样或者直接上样（重力法）；
上样量不要超过柱子的结合能力。
2）上样完毕后，用基础缓冲液洗掉未结合的杂蛋白，直到到紫外吸收监测仪达到一个稳定的基线（一般需要10-15个柱体积）；
3）使用洗脱液洗脱目的蛋白，顺次接收并做好标记，直到到紫外吸收监测仪达到一个稳定的基线（一般需要5-10个柱体积）；
4）SDS-PAGE检测分析得到的纯化样品（包括流穿组分、洗杂组分和洗脱组分）以及原始样品。
3.纯化柱清洗、再生与保存。
1）5-10倍柱床体积的洗脱液继续清洗；
2）3倍柱床体积的去离子水清洗；
3）15倍柱床体积的1M NaOH溶液再生；
4）用30倍柱体积的基础缓冲液清洗;
5）3倍柱床体积去离子水清洗后于含20%乙醇的PBS 2-8℃保存。
鄂公网安备：
