鱼IgM纯化试剂盒
货号:IGP0022K
本试剂盒用于从鱼血清中纯化IgM,特别优化了纯化流程使纯化更为简单,特别适合于从鱼血清中纯化IgM。
试剂盒组分:
组分名称 | 规格 | 数量 |
IgM纯化填料 | 1ml | 1 |
亲和层析柱 | 1支 | 1 |
洗涤母液(10×) | 30ml | 1 |
洗脱缓冲液 | 30ml | 1 |
中和缓冲液 | 30ml | 1 |
试剂盒操作说明:
1. 将IgM纯化填料重悬,转移到亲和层析柱,快流干液体时加洗涤液(洗涤液于实验前配制,洗涤母液:去离子水=1:9)洗涤填料3次(每次快流干时将洗涤液加满);
2. 洗涤液快流干时,将鱼血清(血清使用前需0.45um过滤除去大的团块或者纤维沉淀,避免堵塞填料)从上部缓慢加入;
3. 鱼血清加完后,快流干时加洗涤缓冲液,反复洗涤5次;
4. 洗涤缓冲液快流干时,从层析柱顶部加入洗脱缓冲液,每次1ml,等快流干时候再加1ml;
5. 加入洗脱缓冲液的同时从层析柱底端分管接收洗脱的抗体,每个管子接收1ml,并依次标记;如果层析柱下端连接核酸蛋白检测仪可以直接接收吸收峰;
6. 迅速在每个接收管子里面加入2/5体积的中和缓冲液;
7. 中和后的抗体脱盐柱脱盐或装入透析袋用PBS(pH7.4)透析,换液三次,2h/次,如果浓度太低,用PEG20000浓缩;
8. SDS-PAGE检测抗体浓度;
9. 填料柱用10倍柱体积PBS(pH7.4)清洗5次,加入含20%乙醇的PBS(pH7.4)4℃保存。
注意:纯化前,需客户自备PBS(pH7.4)、 含20%乙醇的PBS(pH7.4)
*本试剂仅供实验室研究使用