关键词:抗体制备抗体标记重组蛋白表达

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链霉亲和素包被微孔板


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产品品牌:Frdbio 产品货号:ELS2235
保存温度:2~8°C 有效日期:6个月
英文名称:
规      格: 5块/盒
价      格:优惠价 ¥750
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链霉亲和素包被微孔板说明书

产品编号

产品名称

规格

ELS2235

链霉亲和素包被微孔板

96T

保存条件:2-8℃避光干燥保存

1.产品简介:

本产品采用福因德生物共价包被技术, 使链酶亲和素( Streptavidin,SA)高密度定向共价偶联到酶标板微孔内,排列均匀,稳定性高,不易脱落,这种板称为SA Bioconjugate微孔板。此微孔板的Biotin最大结合量达到每孔6pmol,使用Biotin-IgG(Rab bit)的最低检测限低至0.5 ng。

本产品可广泛用于免疫沉淀、免疫检测(ELISA)及各类核酸、蛋白质杂交反应。

2.产品信息:

1)灵敏度:0.5ng/well(Rabbit Biotin-IgG)

2)包被体积:100uL

3)Biotin最大结合量:5pmol/well

4)保质期:短期内可2-8度保存,长期使用请放置-20保存(2年左右)

3.产品应用范围:

1)免疫检测(ELISA):酶标板可特异性地结合Biotin标记蛋白(抗原、抗体),可广泛应用于夹心法、竟争法或间接法ELISA实验。

2DNA-蛋白质相互作用研究实验:酶标板可特异性地结合Biotin标记的靶点DNA片段,可用于分析基因表达调控中蛋白因子的作用位点,或者DNA结合蛋白的研究。

4.操作步骤:(参考实施例)

(说明书提供夹心法ELISA的操作步骤,仅供参考。建议使用前每孔加入200ulPBST缓冲液或体系中使用到的其他洗涤缓冲液清洗1-2遍)

1)试剂准备(试剂需客户自备)

(1)PBS-T: 10 mM NaH2PO4,1 mM KH2PO4,137 mM NaCI, 3 mM KCI,0.05% Tween-20,pH7.4;

(2)生物素标记的抗体(捕获抗体) ;

(3)酶标记或其他信号分子标记的抗体(检测抗体);

(4)牛血清白蛋白(BSA)。

2)生物素标记抗体与包被板的结合反应

(1)抗体的稀释:用PBS-T将生物素标记抗体稀释至1 ug/mL,置于冰上备用。

(2)抗体结合反应:向微孔中加入100uL稀释后的生物素标记抗体,将微孔板放置于水平摇床上室温振荡孵育1~2h。

(3)洗涤:尽量吸去微孔中的液体,再加入200uL PBS-T,将微孔板放置于水平摇床上振荡5 min,吸去微孔中的液体。重复此洗涤步骤3~5次。

3)封闭(此步骤可省略)

(1)封闭:向微孔加入100uL含5% BSA的PBS-T,将微孔板放置于水平摇床上室温振荡孵育1 h。

(2)洗涤:尽量吸去微孔中的液体,再加入200uL PBS-T,将微孔板放置于水平摇床上振荡5 min,吸去微孔中的液体上清液。重复此洗涤步骤3~5次。

4)待测抗原的捕获反应

(1)抗原样品的稀释:用PBS-T对含有待测抗原的样品进行稀释。ELISA的检测范围约为0.1~200ng/mL(视所用抗体-抗原配对的亲和力的不同而有所不同),请根据样品中待测抗原的含量进行若干个不同倍数的稀释。

(2)抗原的捕获:向微孔中加入稀释后的抗原100uL,将微孔板放置于水平摇床上室温振荡孵育1~3 h(或4℃静置孵育过夜)。

(3)洗涤:尽量吸去微孔中的液体,加入200uL PBS-T,将微孔板放置于水平摇床上振荡5 min,吸去微孔中的液体。重复此洗濠步骤3~5次。

5)抗体检测反应

(1)酶标检测抗体的稀释:用含5%BSA的PBS-T对酶标检测抗体进行稀释,稀释的倍数请参考酶标抗体的相关使用说明。

(2)检测抗体与抗原的结合:向微孔中加入稀释后的检测抗体100uL,将微孔板放置于水平摇床上振荡孵育1h。

(3)洗涤:尽量吸去微孔中的液体,加入200uL PBS-T,将微孔板放置于水平摇床上振荡5 min,吸去微孔中的液体。重复此洗濠步骤3~5次。

(4)显色:请根据酶标抗体的使用说明进行显色反应,并在酶标仪上读取对应的显色结果。

 

注意事项

1)本产品长期使用需置于 负20℃保存,开封后的微孔板应注意避光干燥保存。

2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

*本试剂仅供实验室研究使用


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