1.包装清单:
产品编号 | 产品名称 | 规格(10 ml) | 规格(50 ml) |
BHC0730-1 | 高碘酸氧化液 | 10 ml | 50 ml |
BHC0730-2 | Schiff试剂 | 10 ml | 50 ml |
BHC0730-4 | 苏木素染液 | 10 ml | 50 ml |
BHC0730-5 | 重亚硫酸盐溶液 | 30 ml | 120 ml |
— | 说明书 | 1份 | 1份 |
2.产品简介:
PAS染色法(Periodic Acid-Schiff stain)在组织学上,主要用来检测组织中的糖类。过碘酸将胞浆内糖原或多糖类物质(如粘多糖、粘蛋白、糖蛋白、糖脂等)中的乙二醇基氧化成二醛基,与Schiff试剂中的品红结合形成紫红色染料而沉积在细胞内多糖所在处。糖原及其它PAS反应阳性物质均呈红色,细胞核呈蓝色。
3.保存条件:2-8℃保存,6个月内有效 。
4.使用说明:
A.标本处理:
1) 5%的乙醇固定过的冰冻切片或者细胞片直接用水洗2-3次;
2) 石蜡切片常规脱蜡至水: 二甲苯(I)5 min→二甲苯(Ⅱ)5 min→100%乙醇2 min→95%乙醇1 min→80%乙醇1 min→75%乙醇1 min→蒸馏水洗2 min。
如涂片需要消化,可加唾液或麦芽糖淀酶,置室温消化60min,然后用蒸馏水冲洗。
B.氧化:
10 g/L的高碘酸氧化液氧化15-20 min后用流水充分水洗,再用蒸馏水洗涤2次,晾干。
C.染色及复染:
1) Schiff试剂室温染色15-30 min(此步为避光反应,最好在通风处,用完试剂请立即盖严盖子)。
2) 吸干或者甩去Schiff试剂(如果不用重亚硫酸盐溶液洗,此步可直接用水冲洗)。
3) 用重亚硫酸盐溶液冲洗3次(一般此步可省,直接用蒸馏水洗)。
4) 蒸馏水洗,晾干。
5) 苏木素染液染胞核2-3min(选做)。
6) 蒸馏水洗。
7) 脱水,中性树胶封片。95%乙醇(I)1 min→95%乙醇(Ⅱ)1 min→100%乙醇(I)1 min→100%乙醇(Ⅱ)1 mi→二甲苯石碳酸(3:1)1 min→二甲苯(I)1 min→二甲苯(Ⅱ)1 min→中性树胶封固
D.染色结果:
镜下观察:糖原及其它PAS反应阳性物质均呈红色,细胞核呈蓝色。
5.注意事项:
2) 固定试剂不同,染色效果不同。通过效果验证建议选乙醇为固定剂。
3) 10g/L高碘酸溶液质量要保证,变黄则不能用,氧化时间要准确,否则将导致假阳性或假阴性。
4) 碱性品红试剂对染色的影响不同品牌的碱性品红染色效果不一,碱性品红的质量是试验成败的关键因素之一。希夫(Schiff)染液应避光保存,为无色,若变红则失效不能使用;
5) 染色后标本应及早观察和记录,染色后标本保存8天后,将逐渐褪色,保存时间延长,褪色更为明显。
*本试剂仅供实验室研究使用