一文释疑“血清灭活”
最近我们推出单克隆开发系列的单抗融合专用血清和即用型培养基,经常被问及血清使用前是否会热灭活。
血清热灭活是指将血清置于56°C热水中30分钟。热灭活的初衷是为了灭活血清中的补体或者支原体等病原。热灭活血清中补体,激活的补体因子会激活淋巴细胞和巨噬细胞,如果我们培养免疫细胞或是原代细胞,可以考虑灭活血清。当然,根据实际细胞实验的具体需求,血清中可能有的干扰物质如果是热敏感性的,也是可以通过热灭活进行处理。
很多学者曾经对市面上商业化血清进行分析发现:胎牛血清中补体成分C1和C6只占成年牛1%-3%,补体中最重要的C3成分,在胎牛血清中几乎检测不到,其他补体成分则不超过成年牛的5%。
又有学者使用不同细胞株,进行灭活血清与不灭活血清对细胞培养的培养效果测试,得出的结论是:对于大多数细胞来说,灭活后不但不能对细胞培养有正面影响,反而带来很多负面影响。
热灭活会对细胞中很多有用的细胞因子或是成分起到损害作用,血清产生沉淀。所以,我们的建议是进行常规的细胞培养,包括单抗研发来说,根本没有必要考虑热灭活的事情,除非培养原代细胞或者免疫细胞时候可以考虑此类问题。
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