抗体的保存

抗体纯化后，一般将其缓冲液置换成PBS，便于后期标记或其他用途使用，如果浓度太低，需要浓缩,抗体浓缩后浓度最好不要太高，太高容易引起沉淀。

1. 抗体的浓缩

1.1 透析袋浓缩

将纯化的抗体装入透析袋中，透析袋表面覆满PEG20,000进行浓缩（不要用蔗糖浓缩）。

1.1.2 超滤管浓缩

将纯化的抗体转入15 ml的超滤管，3,500rpm离心12min左右（根据要浓缩的体积摸索离心时间）。

2. 抗体浓度测定

取适量抗体检测OD280nm的吸光度，读数不要超过2。如果读数超过2，再稀释，用吸光度读数除以1.35，再乘以稀释倍数即为抗体的大致浓度（mg/ml）。抗体的浓度（mg/ml）也可以用（OD280nm-0.35×OD495nm）/1.4这个公式计算。

3. 抗体的保存

3.1 纯化完的抗体推荐于PBS或者TBS溶液保存，可添加0.1%叠氮化钠防腐剂，但是叠氮化钠可能对下游实验中的辣根过氧化物酶产生抑制作用，作为免疫检测试剂开发的抗体一般使用有机化合物高分子防腐剂，避免对下游酶或者荧光染料的影响，如有需要可联系福因德生物。

3.2 分装成小管，避免污染或者反复冻融，溶解时需要缓慢解冻，不可直接放热水急速解冻。

3.3 存放抗体容器不要选择聚苯乙烯材料，可以选择玻璃或者对蛋白低吸附材料的管子。

3.4 如果抗体要进行后期标记，最好在PBS中保存，不加防腐剂，短期内使用可放4℃，长期存放-20℃保存。

3.5 如果抗体只做免疫学实验，不进行标记可以添加保护剂（1% BSA或海藻糖），还可以加30%～50%甘油，-20℃保存，此保存方法只适合下游直接使用（ELISA，IHC，WB），不适合对其进行标记开发，但其在-20℃不结冰，对抗体效价保存较好，并且使用时也不用反复冻融。

3.6 冻干可以保存更长时间，但是同样要加入很多辅料保护剂，如：海藻糖、BSA，加了保护剂后期开发较难；也可以直接不加辅料保护，直接冻干，但效价损失大。

3.7 不管用何种方法保存，应尽量分装成小管便于以后使用，抗体管上明确记录必要信息（名称、编号、时间，效价、纯化人等）并且要建立记录文档记录更详细的信息。

（作为添加剂的BSA或者海藻糖一定要纯度好，不能含有蛋白酶，福因德生物长期致力于抗体稳定性研究，可以提供高品质抗体稳定添加剂。)