【宝典推荐】大肠杆菌质粒载体：方法与应用

这是一本神奇的操作宝典，关于质粒的前前后后，方方面面，基本都介绍到了，并且都附有超级详实的实验步骤和试剂配方等，是分子生物学从业者从0学习的不二选择。文章最后有该实验宝典的下载链接。

1.      质粒的功能和组织

质粒基本特征

2.      如何选择一个合适的质粒作为克隆载体

选择的标准，

3.      大肠杆菌宿主菌株

4.      大肠杆菌的化学转化

化学转化，提到了传统感受态，改良版的感受态，以及PEG转化法

5.      大肠杆菌的电化学转化

6.      通过细菌接合进行 DNA 转移

7.      粘粒包装和大肠杆菌感染

8.      碱裂解法提取质粒

9.      煮沸法提取质粒

10.   使用二氧化硅分离高纯度质粒

11.   使用微孔板高通量提取质粒

12.   从大肠杆菌中分离粘粒和 BAC DNA

13.   从噬菌粒载体制备单链DNA

14.   使用桌面克隆软件来计划、跟踪、并评估克隆项目

15.   将外源基因克隆进质粒载体

16.   DNA片段的凝胶回收

17.   PCR产物的T载体克隆

18.   λ 载体基因组文库的构建

19.   重组质粒的快速筛选

20.   重组质粒的限制性酶切分析

21.   重组 DNA 文库的筛选

22.   利用荧光标记核苷酸测序

23.   Megaprimer引物法定点突变

24.   反向 PCR 定点突变

25.   使用核酸外切酶 III 创建嵌套 DNA 缺失

26.   质粒、粘粒和 BAC中转座子和转座体诱变

27.   体外转录和翻译

28.   用于大肠杆菌表达蛋白的表达质粒

29.   Expression of Recombinant Proteins

30.   使用Lac启动子表达重组蛋白

31.   基于质粒的报告基因: β-半乳糖苷酶和碱性磷酸酶活性测定

32.   基于质粒的报告基因:GFP蛋白

点击下载：E.coli plasmid Vector:Methods and Applications