哺乳动物细胞表达
对于哺乳动物来源的蛋白表达,293细胞和CHO细胞无疑是最佳选择,因为其更接近其复杂的修饰和构想折叠及蛋白聚合,更容易形成复合其本源属性的活性结构和修饰位点,所以哺乳动物表达一直是重组蛋白药物(包括重组抗体药物)的首选方案。
福因德服务于科研重组蛋白表达服务,主要在以下方面做出优化和改进:
自主改进的pFRD表达载体系统,从表达产量,表达适配性方面都做了最佳优化;
不成功不收费(基因合成部分需要支付成本);
定期优化分选表达细胞株(CHO,293系列),使其表达活力更高;
选用最适合的无血清培养基瞬转高效表达,表达量可达几百毫克每升;、
有了悬浮表达系统,重组抗体的表达和纯化都是可以在福因德完成。
如果需要稳转细胞系,我们选用组优势载体和细胞株给你筛选。
服务流程:
1.项目分析出具蛋白表达方案(包含密码子优化,融合标签,纯化方案及可优选宿主细胞);
可交付:项目预实施报告
周期:1-2工作日
2.载体构建及无内毒素质粒大量制备
基因密码子优化及合成,并亚克隆到pFRD系列质粒载体,转染大肠杆菌大量抽提质粒。
可交付:基因合成测序报告;高纯无内毒素重组质粒;
周期:2-3周
3.瞬时转染小试(WB表达分析鉴定)
可交付:表达分析鉴定报告
周期:2-3周
4.表达及纯化(最优条件200ml扩大;.Ni柱亲和纯化;.重组蛋白鉴定检测 )
可交付:蛋白样品50-500ug,SDS-PAGE报告
周期:3-4周
5.放大培养及纯化
根据具体需求洽谈
备注:蛋白不表达或表达量极低,我们无法获得目的蛋白,我们也会提供全套的实验流程和原始照片。
您可能会需要以下技术服务》》》》》》
拥有先进的的蛋白纯化仪器可以帮助客户获得各种高纯度的重组蛋白;
一流的合成和纯化设备,更有经验丰富的技术人员为您提供多肽设计服务;
可为科研客户和医药诊断企业提供不同需求抗体,可提供工业级腹水生产和抗体纯化;
多种动物可供选择,多种类型抗原可供制备;抗体效价高,普遍高于同行1-2个数量级;
协助客户对抗体应用进行全方位技术支持、协助客户开发免疫检测试剂盒;
多种纯化系统供客户选择:离子盐析沉淀法,亲和纯化(ProteinA、ProteinG和ProteinL)及抗原配体特异性纯化;
包括片段化、生物素标记、HRP标记、FITC偶联及Cy3标记…