关键词:抗体制备抗体标记重组蛋白表达

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修饰性抗体制备


服务介绍:

修饰性抗体制备最常见的是磷酸化抗体,乙酰化抗体,甲基化抗体制备等等,磷酸化抗体是目前应用最为广泛,修饰抗体中的代表。

磷酸化抗体用于检测区分蛋白磷酸化和非磷酸化,可以用于磷酸化蛋白的定性和定量分析;目前制备磷酸化抗体主要技术路线是通过设计一条磷酸化多肽以及对应的非磷酸化多肽,磷酸化多肽偶联载体后免疫动物,如果制备多抗,被免疫动物的高免血清,先通过磷酸化多肽偶联的亲和层析填料纯化,再用非磷酸化多肽的填料吸附上述纯化的抗体,最终得到只针对此磷酸化多肽的抗体;如果制备单克隆抗体,磷酸化多肽偶联载体后免疫Balb/C小鼠,细胞融合以后通过细胞上清筛选仅与磷酸化多肽反应而不与非磷酸化反应的细胞株。

磷酸化多抗制备选用两只SPF(Specific Pathogen-Free)级日本大耳白,磷酸化单抗制备选用Balb/c小白鼠,采用完全弗氏佐剂(CFA)和不完全弗氏佐剂(IFA)皮下多点注射。


磷酸化多克隆抗体制备服务内容
所属阶段服务内容交付产品
1设计合成磷酸化多肽 合成10mg磷酸化多肽和5mg非磷酸化多肽• 2~3mg多肽(非磷酸化多肽和磷酸化多肽)
• 1~2ml免疫前血清
• 2~5mg磷酸化抗体
• ELISA检测结果
• 项目报告
2多肽偶联 合成多肽与载体蛋白偶联(KLH,BSA)
3抗血清制备 免疫兔子,免疫前采血,免疫四次并采集血清
4血清检测 血清小样采集和检测
5抗原亲和纯化 磷酸化多肽亲和纯化柱,非磷酸化去除交叉反应
6质检 ELISA检测效价


磷酸化单克隆抗体制备服务内容
所属阶段服务内容交付产品
1设计合成磷酸化多肽 合成10mg磷酸化多肽和5mg非磷酸化多肽
• 5mg修饰多肽、3mg未修饰多肽和抗体产品
  • 50ul
免疫前血清
  • 2-5
株杂交瘤细胞
  • 3-8mg
纯化抗体(2株杂交瘤)ELISA检测结果
  •
亚型鉴定结果
  •
完整项目报告
2多肽偶联 合成多肽与载体蛋白偶联(KLHBSA
3动物免疫与检测 免疫小鼠并用磷酸化和非磷酸化多肽进行ELISA检测
4细胞融合 磷酸化多肽显示出的最佳免疫应答小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合
5增殖与筛选 ELISA检测出阳性克隆并进行亚克隆
6腹水制备及纯化 腹水制备,Protein G纯化
7检测 ELISA检测效价


更多服务>>>>

多肽合成服务

一流的合成和纯化设备,更有经验丰富的技术人员为您提供多肽设计服务;

单克隆抗体制备

可为科研客户和医药诊断企业提供不同需求抗体,可提供工业级腹水生产和抗体纯化;

多克隆抗体制备

多种动物可供选择,多种类型抗原可供制备;抗体效价高,普遍高于同行1-2个数量级;

抗体纯化标记服务

多种纯化系统供客户选择:离子盐析沉淀法,亲和纯化(ProteinA、ProteinG和ProteinL)及抗原配体特异性纯化;

抗体修饰服务

包括片段化、生物素标记、HRP标记、FITC偶联及Cy3标记…



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