单克隆抗体制备——单抗生产

1. 单克隆抗体的生产

目前最常见的单克隆抗体生产主要是细胞培养发酵法和小鼠腹水生产法；细胞发酵生产法由于受到实验条件和生产成本的影响，一般的实验室还是更青睐于小鼠的腹水生产法。小鼠腹水生产法一般要先给小鼠腹腔注射降植烷、液体石蜡或者弗氏不完全佐剂，目前弗氏不完全佐剂应用的最多。

并不是所有的细胞株注入小鼠的腹腔都能顺利产生腹水的，不产腹水除了跟细胞株、小鼠有关系外，还有很多不明原因，基于以上原因，Frdbio推出腹水强力诱导剂。

2. 小鼠腹水生产

2.1 提前一周小鼠腹腔注射0.5ml弗氏不完全佐剂。

2.2 每只小鼠腹腔注射0.5～1×107处于对数生长期的杂交瘤细胞。

2.3 7～15天小鼠腹部逐渐涨大，此时可以采用16号针头通过腹部穿刺抽取腹水，每次可取4～5ml,间隔2天左右可以再行抽取，一般每只老鼠可以抽取2～3次。

2.4 抽取的腹水需要及时离心，2,000离心5min,吸取中间水相层。

2.5 抽取的腹水含有大量细胞、脂肪和油状弗氏佐剂。

2.6 脂质的去除：每10ml腹水加入150mg 二氧化硅，摇动混匀孵育2h，2,000rpm离心20min，取上清。